Erhöhte Widerstandsfähigkeit

Tue, 27 Nov 2018 00:00:00 +0000

Ich bin fest davon überzeugt, dass Unternehmen ein echtes Interesse daran haben, kritisches Feedback zu erhalten. Zumindest sollte dies Teil ihres unternehmerischen Überlebensinstinkts sein. Wenn unzufriedene Kunden einfach zu einem anderen Anbieter wechseln, ohne Feedback zu geben, ist der Schaden bereits angerichtet. Deshalb gebe ich immer Feedback, wenn ein Produkt meinen hohen Qualitätsansprüchen nicht gerecht wird. Dieses Mal schreibe ich jedoch über ein Produkt, mit dem ich sehr zufrieden bin, nämlich das neue GE Healthcare Superdex 75 Increase 10/300 GL . Es handelt sich um eine Gelfiltrationssäule und eine Weiterentwicklung des Vorgängermodells Superdex 75 10/300 GL , die wir seit 30 Jahren verwenden. Der größte Vorteil der „Increase“-Version ist die höhere Druckbeständigkeit. Vor einigen Wochen vergaß ein überarbeiteter Doktorand, die Säule nach dem Gebrauch zu verschließen, und stellte sie zurück in den Kühlschrank, wo das 20-prozentige Ethanol in den folgenden zwei Wochen langsam verdunstete. Der Kühlschrank ist belüftet, und als ich die Säule benötigte, war der Schaden bereits angerichtet: Es gab eine etwa 8 mm große Lücke, und es hatte sich eine trockene Zone von etwa einem Zoll gebildet. Ich füllte die Totvolumina sofort mit entgastem 20-prozentigem Ethanol auf und startete einen sehr langsamen Lauf (0,05 ml/min) über mehrere Stunden, woraufhin ich auf entgastes Wasser und anschließend auf Puffer umstellte. Nach etwa zwei Tagen Laufzeit hatte sich der Spalt auf etwa 3 Millimeter verringert. Der verbleibende Spalt wurde durch Justieren des oberen Adapters beseitigt (ich musste ihn so weit wie möglich festschrauben). Nun musste ich die „reparierte“ Säule testen. Ich führte sowohl einen Funktionstest (Trennung zweier Proteine in PBS) als auch den Aceton-Test (Injektion von 100 µl 2-prozentigem Aceton in Wasser) durch. Ich war äußerst überrascht, als der Aceton-Test etwa 19.000 theoretische Platten anzeigte (das ist mehr, als wir jemals mit unseren alten Superdex-75-Säulen erreicht haben). Und die Trennung der beiden Proteine (RNaseA und BSA) zeigte, dass die Säule nach wie vor voll funktionsfähig ist. Allerdings können wir keinerlei Gelkompression tolerieren, da die Korrekturkapazität des Adapters bereits voll ausgeschöpft ist (GE Healthcare stellte früher einen längeren Adapter her, mit dem wir noch mehr kompensieren könnten, aber das Unternehmen hat beschlossen, dieses Produkt aus dem Programm zu nehmen).Sowohl der Doktorand als auch ich waren nach Erhalt dieser Ergebnisse erleichtert, da der Kauf einer neuen Säule uns 2.200 € gekostet hätte und wir über keine zweckgebundenen Mittel für den Betrieb unserer Zentraleinrichtung haben, wäre ich gezwungen gewesen, diese Kosten auf das Labor des Doktoranden abzuwälzen. Leider habe ich kein Foto von der beschädigten Säule gemacht, da meine instinktive Reaktion darin bestand, sofort mit der Bergung zu beginnen. Die Säule auf dem Bild unten ist jedoch die beschädigte Säule, nachdem die Bergungsaktion abgeschlossen war.

Leistung der HiLoad 26/60 Superdex PG-Gelfiltrationschromatographie-Säule

Mon, 11 Apr 2016 00:00:00 +0000

Die von uns am häufigsten verwendete Technik zur Proteinreinigung ist die Gelfiltration (auch als Größenausschlusschromatographie bezeichnet). Bei der Gelfiltration werden Proteine nach ihrer Größe getrennt (genauer gesagt nach ihrem „Stokes-Radius“, der weitgehend von ihrer Größe und Form bestimmt wird). Für die Gelfiltration großer Proteinmengen haben wir vor etwa 9 Jahren die HiLoad 26/60 Superdex 200 Prep Grade von GE Healthcare erworben (das Modell 26/60 wurde inzwischen durch das HiLoad 26/600 ersetzt, beide sind jedoch nahezu identisch). Mit dieser Säule lassen sich zwei Proteine, deren Größenunterschied 100 % beträgt, sehr sauber trennen. Daher eignet sie sich zur Trennung von monomeren und dimeren Formen desselben Proteins. Das „Verfallsdatum“ der Säule war März 2012. Nach unserer Erfahrung kann eine solche Säule bei sachgemäßer Handhabung problemlos eine Lebensdauer von 10 bis 15 Jahren erreichen (wir verwenden sie nicht sehr oft, lagern sie in 20 %igem Ethanol und bewahren sie bei +4 °C auf, wenn wir sie über längere Zeit nicht benötigen).

Superdex on Michael’s Domain

Erhöhte Widerstandsfähigkeit

Leistung der HiLoad 26/60 Superdex PG-Gelfiltrationschromatographie-Säule