https://jeltsch.org/fi/tags/proteiinin-ilmentyminen/Recent content in Proteiinin Ilmentyminen on Michael’s DomainHugofiCopyright © 2002 - 2026 Michael Jeltsch.Fri, 24 Jul 2026 00:18:18 +0300https://jeltsch.org/fi/bioactive_vegf_c_from_e_coli_without_in_vitro_folding/Fri, 28 Oct 2022 00:00:00 +0000https://jeltsch.org/fi/bioactive_vegf_c_from_e_coli_without_in_vitro_folding/<p>Artikkelimme <strong>”Bioaktiivinen VEGF-C <em>E. colista</em></strong>” on julkaistu <em>Scientific Reports</em> -lehdessä. Lue täältä: <a href="https://doi.org/10.1038/s41598-022-22960-0.As" target="_blank" rel="noopener noreferrer nofollow">https://doi.org/10.1038/s41598-022-22960-0.As&nbsp; <svg class="svg-inline--fa fas fa-up-right-from-square fa-2xs" fill="currentColor" aria-hidden="true" role="img" viewBox="0 0 512 512" overflow="visible"><use href="#fas-up-right-from-square"></use></svg></a> Itse asiassa tein ensimmäiset kokeet, joissa ilmentin VEGF-C:tä <em>E. colissa</em> vuonna 1999, mutta en koskaan saanut aktiivista proteiinia. Seuraavien yli 15 vuoden ajan käytimme VEGF-C:n tuottamiseen yksinomaan eukaryoottisoluja (hiivaa, S2/Sf9/Hi5-hyönteissoluja, CHO-soluja). Elvytimme ”VEGF-C <em>E. coli</em>:ssa” -projektin muutama vuosi sitten ja saavutimme lopulta tavoitteemme viime vuonna. Työmäärä oli kuitenkin paljon suurempi kuin alun perin olimme arvioineet. Alussa kaikki yritykset epäonnistuivat, ja pelastaaksemme projektin kehitimme in vitro -taitto-ohjeiston. Oli ehkä enemmän onnea kuin osaamista, että törmäsimme liukoisuustunnisteen ja redox-modifioidun <em>E. coli</em>-kannan yhdistelmään, jolla onnistui tuottaa suoraan bioaktiivista VEGF-C:tä ilman in vitro -taitto-vaihetta. Päätimme sisällyttää tulososioon myös epäonnistuneet yrityksemme (CyDisCo ja periplasmainen ilmentyminen) välttääksemme ”file drawer effect” -ilmiön.</p>