Parantunut sietokyky

Tue, 27 Nov 2018 00:00:00 +0000

Uskon vakaasti, että yritykset ovat aidosti kiinnostuneita saamaan rakentavaa palautetta. Sen pitäisi olla vähintäänkin osa niiden yrityksen selviytymisvaistoa. Kun tyytymättömät asiakkaat yksinkertaisesti vaihtavat toiseen toimittajaan antamatta palautetta, vahinko on jo tapahtunut. Siksi annan aina palautetta, jos tuote ei täytä korkeita laatuodotuksiani. Tällä kertaa kirjoitan kuitenkin tuotteesta, johon olen ollut erittäin tyytyväinen, nimittäin uudesta GE Healthcare Superdex 75 Increase 10/300 GL . Kyseessä on geelisuodatuskolonni ja edellisen [Superdex 75 10/300 GL] -mallin ( https://www.gelifesciences.com/en/us/shop/chromatography/prepacked-columns/size-exclusion/superdex-75-10300-gl-and-5150-gl-p-05899 ) -mallin versio, jota olemme käyttäneet viimeiset 30 vuotta. ”Increase”-mallin suurin etu on sen parempi paineenkestävyys. Muutama viikko sitten ylikuormitettu jatko-opiskelija unohti sulkea kolonnin käytön jälkeen ja palautti sen jääkaappiin, jossa 20-prosenttinen etanoli haihtui hitaasti seuraavien kahden viikon aikana. Jääkaappi on tuuletettu, ja kun tarvitsin kolonnia, vahinko oli jo tapahtunut: Siellä oli ehkä 8 mm:n rako ja noin yhden tuuman pituinen kuiva vyöhyke oli muodostunut. Täytin välittömästi kuolleet tilavuudet kaasuttamattomalla 20-prosenttisella etanolilla ja aloitin erittäin hitaan ajon (0,05 ml/min) useaksi tunniksi, minkä jälkeen vaihdoin kaasuttamattomaan veteen ja sitten puskuriin. Noin kahden päivän ajon jälkeen rako oli pienentynyt noin 3 millimetriin. Jäljellä oleva rako poistettiin säätämällä yläadapteria (minun piti kiristää se mahdollisimman tiukalle). Nyt minun piti testata ”korjattu” kolonnia. Tein sekä toimintatestin (erottamalla kaksi proteiinia PBS:ssä) että asetonitestin (injektoimalla 100 µl 2-prosenttista asetonia veteen). Olin valtavan yllättynyt, kun asetonitesti osoitti noin 19 000 teoreettista levyä (mikä on enemmän kuin mitä olemme koskaan saaneet vanhoilla Superdex 75 -kolonneillamme). Ja kahden proteiinin (RNaseA ja BSA) erottelu osoitti, että kolonnin toiminta on edelleen täysin kunnossa. Emme kuitenkaan voi sallia minkäänlaista geelikompressiota, sillä adapterin kyky korjata sitä on käytetty täysimääräisesti (GE Healthcare valmisti aiemmin pidempää adapteria, jonka avulla olisimme voineet kompensoida vielä enemmän, mutta he päättivät lopettaa tämän tuotteen valmistuksen).Sekä jatko-opiskelija että minä olimme helpottuneita näiden tulosten jälkeen, sillä uuden kolonnin ostaminen olisi tullut meille kalliiksi (2 200 €), ja koska meillä ei ole erillistä rahoitusta yhteiskäyttölaitoksemme ylläpitoon, olisin joutunut siirtämään tämän kustannuksen jatko-opiskelijan laboratorion vastuulle. Valitettavasti en ottanut kuvaa vaurioituneesta kolonnista, sillä vaistomainen reaktioni oli aloittaa pelastustoimet välittömästi. Alla olevassa kuvassa näkyvä kolonnin on kuitenkin se vaurioitunut kolonnin, kun pelastustoimet oli saatu päätökseen.

HiLoad 26/60 Superdex pg -geelisuodatuskromatografiakolonnin suorituskyky

Mon, 11 Apr 2016 00:00:00 +0000

Yleisin käyttämämme proteiinien puhdistustekniikka on geelisuodatus (jota kutsutaan myös kokosuodatuskromatografiaksi). Geelisuodatuksessa proteiinit erotellaan niiden koon perusteella (tai tarkemmin sanottuna niiden ”Stokesin säteen” perusteella, joka määräytyy suurelta osin niiden koon ja muodon mukaan). Suurten proteiinimäärien geelisuodatusta varten hankimme GE Healthcaren HiLoad 26/60 Superdex 200 prep grade noin 9 vuotta sitten (malli 26/60 on korvattu mallilla HiLoad 26/600, mutta molemmat ovat lähes identtisiä). Tällä kolonnilla voidaan erottaa erittäin puhtaasti kaksi proteiinia, joiden kokero ero on 100 %. Siksi se sopii saman proteiinin monomeeristen ja dimeeristen versioiden erottamiseen. Kolonnin ”viimeinen käyttöpäivä” oli maaliskuu 2012. Kokemuksemme mukaan tällainen kolonnin käyttöikä voi asianmukaisessa käsittelyssä helposti olla 10–15 vuotta (emme käytä sitä kovin usein, säilytämme sitä 20-prosenttisessa etanolissa, ja jos emme tarvitse sitä pidempään aikaan, säilytämme sitä +4 °C:ssa).

Superdex on Michael’s Domain

Parantunut sietokyky

HiLoad 26/60 Superdex pg -geelisuodatuskromatografiakolonnin suorituskyky