JetPEI-transfektio hyönteissoluissa

DNA:n vieminen soluihin on yksi nykypäivän biotieteiden perusvaatimuksista. DNA:n viemiseen soluihin on monia tapoja: eksoottisempia menetelmiä ovat esimerkiksi ampuminen ja sähköiskut, mutta yleisimmissä menetelmissä käytetään kemikaaleja, joita kutsutaan transfektioreagensseiksi. Nämä sekoittuvat jollain tavalla DNA:n kanssa ja auttavat sitä läpäisemään plasmamembraanin. PEI (polyetyleeniimiini) on yksi ”halvimmista” transfektioreagensseista. Jos valmistat sen itse, se maksaa todennäköisesti suunnilleen saman verran kuin kalsiumfosfaattitransfektio (joka on yksi vanhimmista ja edullisimmista menetelmistä). Jopa kaupallisesti saatavilla olevat valmisteet, kuten JetPEI ja PEIMax, ovat edullisia verrattuna moniin muihin transfektioreagensseihin. Ne eivät kuitenkaan toimi kovin hyvin hyönteissoluissa. Kun kysyin – ehkä kymmenen vuotta sitten – toimittajalta (Polyplus Transfections), he toimittivat minulle räätälöidyn protokollan hyönteissolujen transfektioon JetPEI:llä. Olen käyttänyt sitä menestyksekkäästi, mutta lähinnä vain vakaiden solulinjojen tuottamiseen. Vakaita transfektantteja valmistettaessa hieman alhaisempi transfektiotehokkuus on hyväksyttävää. En kuitenkaan löytänyt kyseistä protokollaa mistään verkosta, joten olen liittänyt sen tähän viestiin kaikille, jotka tarvitsevat tätä tietoa. Lyhyesti sanottuna DNA:n ja transfektioreagenssin määriä lisätään alhaisemman tehokkuuden kompensoimiseksi.