Aufreinigung und Charakterisierung rekombinanter Proteine

Zuletzt verändert am 24. Juli 2026 • 2 Min. Lesezeit • 258 Wörter
Wissenschaft   Universität Helsinki   Lehre   FPLC   Äkta Avant 25   Äkta Explorer 100   GE Healthcare   Proteine   Rekombinante Proteine   Aufreinigung   Chromatographie   DPBM   Helsinki Biomedical Graduate School   Protein a Sepharose   Ni²⁺-Sepharose   Gelfiltration   Affinitätschromatographie   Größenausschlusschromatographie   Proteinaufreinigung   ITC   Protein-Wechselwirkungen  
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Vom 4. bis zum 20. Dezember veranstalten wir (erneut) einen praxisorientierten Kurs zur Proteinreinigung.
Aufreinigung und Charakterisierung rekombinanter Proteine
Bild von Michael Jeltsch

Wir organisieren (erneut) einen praxisorientierten Kurs zur Proteinreinigung vom 4. bis zum 20. Dezember. Wir können maximal 16 Teilnehmer aufnehmen, die in Gruppen von 2 bis 4 Teilnehmern eingeteilt werden. Jede Gruppe benötigt drei volle Tage, um die praktischen Übungen durchzuführen, wobei sich der dritte Tag des Kurses mit dem ersten Tag der nächsten Gruppe überschneidet. Veranstaltungsort ist das Biomedicum Helsinki, Räume A516a1 (wo sich die Geräte befinden) und B318a/b (unser Labor). Wir werden ein Protein (VEGF-Rezeptor 3) mithilfe eines zweistufigen Protokolls (Affinitätschromatographie + Gelfiltration) auf dem Äkta Avant FPLC-Gerät aufreinigen. Am dritten Kurstag werden wir die Wechselwirkung dieses Proteins mit seinem Liganden (VEGF-C) auf dem ITC-Gerät (isotherme Kalorimetrie) untersuchen. Wir haben bereits 2015 einen ähnlichen Kurs angeboten ( http://www.helisci.fi/hbgs/FPLC2015/)  . Dieser neue Kurs ( https://courses.helsinki.fi/en/DPBM-135/120171139  ) wird einen ähnlichen Aufbau haben, wir erweitern ihn jedoch um einen Tag, um Protein-Wechselwirkungen mithilfe des neuen Isothermischen-Kalorimetrie-Geräts unserer B3P-Kernanlage zu analysieren. Die Dokumentation und die Ergebnisse werden ebenfalls hier verfügbar sein.Da wir maximal zwei Proben gleichzeitig bearbeiten können (wir verfügen „nur“ über zwei FPLC-Geräte), müssen wir die Teilnehmer in Gruppen (mit jeweils 2–4 Studierenden) aufteilen und den dreitägigen Kurs je nach Teilnehmerzahl mehrmals wiederholen.

Tag 1 (3 Stunden) 14:00 - Vorbereitung des FPLC-Geräts 16:00 – Beginn der Probenbeladung der Affinitätschromatographiesäule

Tag 2 (6 Stunden) 8:00 – 9:00 – Waschen und Elution der Affinitätschromatographiesäule 9:00 – 11:00 - Größenausschlusschromatographie 11:00 – 16:00 - SDS-PAGE & Coomassie-Färbung

Tag 3 (5 Stunden) 9:00 – 12:00 - ITC-Run mit den gereinigten Proteinen (Antikörper-Antigen-Wechselwirkung oder Rezeptor-Ligand-Wechselwirkung) 13:00 – 15:00 – Diskussion und Auswertung der Ergebnisse

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